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液基細(xì)胞粘附載玻片

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液基細(xì)胞粘附載玻片

發(fā)布日期:2017-01-09 00:00 來源:http://www.zplh.cn 點(diǎn)擊:

防脫片又名粘附載玻片、離子潤(rùn)飾玻片和細(xì)胞捕獲玻片等,是用化學(xué)或物理辦法進(jìn)行載玻片或蓋玻片的外表潤(rùn)飾,常用于細(xì)胞培育、病理學(xué)安排和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片,以避免操作過程中細(xì)胞或安排掉片景象的發(fā)作。 產(chǎn)品規(guī)格:76x26mm,1~1.2mm,50片/盒 防脫片分類 防脫片可分為:通常防脫載玻片、離子潤(rùn)飾玻片、正電荷玻片、負(fù)電荷玻片、醛化玻片、硅化玻片、氨基化玻片和細(xì)胞捕獲玻片等。而玻片載體可以用載玻片、蓋玻片、培育皿或培育瓶等。 防脫片成分 防脫片的成分為載玻片(蓋玻片)、玻片潤(rùn)飾劑(黏附劑),常用的黏附劑有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷)、多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)、明膠、蛋清等。細(xì)胞學(xué)常用黏附劑為APES和多聚-L-賴氨酸 ,安排學(xué)常用明膠、蛋清等。 防脫片的運(yùn)用 防脫片用于細(xì)胞培育、病理學(xué)安排和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片,尤其是在液基細(xì)胞學(xué)薄層制片中防脫片的質(zhì)量至關(guān)重要,而多聚左旋賴氨酸為現(xiàn)在免疫安排化學(xué)染色中最常用的防脫片劑,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如效果欠安,可用兩層處理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上兩種辦法均無效的情況下,可用如下辦法:切片在脫蠟前放在APES l:50丙酮溶液中浸泡3分鐘,曬干后即可進(jìn)行下一步驟。 現(xiàn)在在細(xì)胞培育、病理學(xué)安排和細(xì)胞制片、液基細(xì)胞學(xué)薄層制片的運(yùn)用中,細(xì)胞捕獲玻片運(yùn)用最廣,附著力強(qiáng)、粘附的細(xì)胞多。 防脫片常用制備辦法 一、載玻片和蓋玻片的處理 將載玻片或培育用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清洗液中24小時(shí),然后流水充分沖刷,再用蒸餾水沖刷3遍以上,而后置95%乙醇中12小時(shí)。取出擦干或烤干,貯放于玻片盒內(nèi)備用。蓋玻片很薄,以上處理程序有必要縮短時(shí)間,清洗液浸泡只需2小時(shí),流水沖刷留神勿危害玻片。 二、常用黏附劑的運(yùn)用 1.多聚左旋賴氨酸(poly-1-lysine) 首要制作0.1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液,室溫下(18~26℃)可保存1年。運(yùn)用時(shí),將試劑10倍稀釋成工作液,濃度為0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3個(gè)月。運(yùn)用辦法是將充分洗凈和預(yù)先單調(diào)的玻片浸泡于稀釋后的多聚左旋賴氨酸溶液數(shù)十秒或提拉十次,瀝干.于室溫下曬干12-24小時(shí)或在45℃以下烤箱內(nèi)烘干。處理后的玻片避光單調(diào)可保存三個(gè)月。 2.APES(3-氨丙基-乙氧基甲硅烷) APES有必要現(xiàn)用現(xiàn)配。用此辦法黏合的玻片應(yīng)筆直烤片而不能水平烤片,不然,安排片中易出現(xiàn)氣泡。 APES的運(yùn)用辦法:用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合),將洗凈的玻片放人稀釋好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES。置通風(fēng)櫥中曬干即可。留神用APES防脫片處理的載玻片撈片時(shí)安排應(yīng)一步到位.并盡量減少氣泡存在,避免影響染色成果。留神不要將APES與其他防脫片劑混合運(yùn)用。

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